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内质网蓝色荧光探针(活细胞成像用)图片
产品货号:
KM0045
中文名称:
内质网蓝色荧光探针(活细胞成像用)
英文名称:
ER-Tracker Blue-White DPX
产品规格:
50μL|5×50μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本品为ER-Tracker Blue-White DPX的DMSO储存液,浓度为1mM。用于活细胞内质网染色,建议工作浓度为100nM~1μM,需根据实际情况做优化调整。

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料,高度选择性结合内质网(ER)。不同于传统的内质网染料DiOC6(3),该系列染料极少染色线粒体,且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后,可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl(DPX)染料家族的成员之一,这类染料具有长发射波长,高吸光系数,高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针,随着溶剂极性的增加,最大荧光迁移到更长的波长,伴随着光量子产量降低。

主要参数:
分子式:C26H21F5N4O4S
分子量:580.5283
外观:黄色液体
Ex/Em:374/430~640nm(in methanol)
检测滤片:DAPI or UV longpass
保存:≤-20oC避光干燥保存,收到货至少6个月有效。

注意事项:
1.整个染色过程中需注意避光。
2.由于ER-Tracker Blue-White DPX是环境敏感型探针,会产生波动较大的发射吸收峰,在430~640nm之间出现。长通DAPI滤光片观察效果最理想。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法:
以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞(BPAE)优化所得,且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考,请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

一、试剂准备
ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO储存液形式提供,使用前请将ER-Tracker Blue-White DPX从冰箱内取出,确保回温至室温后,经短暂离心将所有溶液沉到管底。

二、细胞染色
1.制备染色工作液:将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀释至工作浓度,建议工作浓度100nM~1μM。为了最小化染料过高引起的假象,建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。
注意:在含Ca2+/Mg2+的Hank's平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg,Cat# KM0185)内进行染色可得到最佳结果。
2.细胞染色:对于贴壁细胞,吸除培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液,37℃孵育15~30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养基,并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定,请跳转到步骤三。

三、细胞固定及透化
1.固定和透化细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞10~20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定后仅能部分保留下来。如果还需要做其他染色,细胞需用0.2%TritonX-100透化处理10min。
2.清洗和观察细胞:细胞固定后,用合适缓冲液清洗2次,每次5min。之后荧光显微镜下观察。
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